Настоятели храма назначались непосредственно Правящим Священным Синодом Российской Православной Церкви. Благолепие служб обеспечивалось, среди прочих, и штатным хором, присылаемым из России. Священники, диаконы и певчие, служившие здесь в XIX и первой половине XX века, похоронены на территории, прилегающей к храму-усыпальнице.
1803-1804. Протоиерей Андрей Самборский
Первый настоятель, духовник великой княгини Александры Павловны, законоучитель внуков императрицы Екатерины Великой, церковный и общественный деятель, устроитель и директор первой в России «Практической школы земледелия». Тесть директора Царскосельского лицея, А.С.Пушкин хранил теплую память о семье Самборских. Скончался 5 октября 1815 года в Санкт-Петербурге, похоронен на Большеохтинском кладбище.
1804-1810. Протоиерей Николай Музовский
Родился в 1772 году. О нем оставил воспоминание В.Броневский в путевых заметках: «Отец Николай Музовский заслужил здесь великое уважение. Крестьяне протестантского исповедания приходят к нему из дальних деревень, он читает им Евангелие на немецком языке; по праздникам же посещают его добрые сербы из соседних деревень».В Иреме скончалась его супруга, ее могила была первой на русском кладбище возле храма, но до наших дней эта могила не сохранилась. По окончании служения в Венгрии, стал «законоучителем православного вероисповедания» в Царскосельском лицее (с 1811 по 1816 годы), когда там учился А.С.Пушкин. Сопровождал принцессу Шарлоту (будущую императрицу Александру Федоровну) в ее путешествии из Берлина в Петербург в 1817 году. Стоял во главе военного духовенства на должности обер-священника армии и флота (1827-48 гг.), был преподавателем Санкт-Петербургской духовной семинарии и членом Российского Библейского общества. Духовник Государя Императора Николая Первого, придворный протопресвитер, член Святейшего Правительствующего Синода. Скончался в 1848 году.
1810-1817. Иеромонах Герман
Оставил по себе добрую память строгой иноческой жизнью, всегдашней готовностью оказать услугу, подать помощь нуждающимся. Возвратился в Россию по старости и слабости здоровья; где и когда умер, неизвестно. При нем в 1814 году во время проведения Венского конгресса совместно посетили храм: российский император Александр I, король Пруссии Фридрих Вильгельм и император Австрийский Иосиф. В 1815 году гробницу сестры посетила великая княгиня Екатерина Павловна в сопровождении австрийского эрцгерцога Иоганна.
1817-1827. Иеромонах Геннадий
Его имя значится на двух надгробных памятниках, поставленных им над умершими в 1825 году псаломщиками. В качестве духовника сопутствовал императору Александру I в его дипломатических поездках по странам Европы. Несмотря на высокое положение при дворе и расположение императора, старец не соблазнился великосветским блеском, а вернулся к простому монашескому житию. В 1831 году во время эпидемии холеры в Петербурге он служил для больных в лазаретах. В 1834 году прибыл в монастырь Оптина пустынь, где оставался в молитвенных подвигах вплоть до своей мирной кончины в 1846 году. О нем есть сведения в Патерике Оптиной пустыни, где он упоминается среди подвижников благочестия этой обители.
1827-1831. Протоиерей Феодор Раевский
Прежде служил в Измайловском полку, семьянин, человек уже немолодой и заслуженный; вернулся в родную Орловскую губернию, где и скончался. Его имя выгравировано на трисвечнике, подаренном Иремскому храму.
1832-1846. Иеромонах Амфилохий
О нем есть упоминание в записках И.И.Срезневского (1812-1880), посетившего Ирем в мае 1842 года: «Он очень приятный человек, служит здесь уже 11 лет и начинает забывать русский язык». При нем в 1838 году был проведен первый ремонт храма, о чем есть надпись на кресте в крипте. На память о себе он подарил набор прекрасного богослужебного облачения из золотой парчи. Скончался 15-го марта 1846 года и погребен на кладбище близ церкви.
1847-1849. Иерей Василий Судакевич
В 1845 году окончил курс Санкт-Петербургской Духовной академии со степенью кандидата. До назначения в Ирем служил диаконом в парижской церкви. Скончался в январе 1849 года от чахотки, погребен в Иреме.
1850-1870. Протоиерей Василий Войтковский
Закончил курс Санкт-Петербургской Духовной академии в 1849 году со степенью магистра. Много занимался вопросами обновления Иремского храма. Во время его служения 11 сентября 1852 года храм посетил наследник русского престола Великий князь Александр Николаевич, а в 1866 году — Великий князь Константин Николаевич. Вернулся в Россию, стал профессором церковной истории и богословия в Императорском Новороссийском университете и настоятелем университетского храма, который тоже был посвящен святой мученице царице Александре. Скончался в 1904 году, оставив после себя богатое научное наследие. В Иреме похоронен его сын Иоанн Васильевич Войтковский, умерший в младенчестве 31 августа 1867 г.
1870-1875. Протоиерей Константин Кустодиев
Сын сельского дьякона, родился около 1837 г. в Саратовской губернии, образование получил в Саратовской духовной семинарии и в Московской духовной академии. Литературный критик, историк, богослов, путешественник, журналист — печатался в «Московских Ведомостях», «Христианском Чтении» и других известных журналах. В Мадриде был настоятелем посольской церкви, членом ученого общества «Атеней». Во время настоятельства в Иреме, также окормлял приписной приход в Карловых Варах. В 1874 году избран профессором Санкт-Петербургского университета на кафедру богословия, но заболел тифом во время поездки по Италии и умер в 1875 году. Погребен в Иреме.
1875-1877. Иерей Михаил Мансветов
Определен в Ирем из Санкт-Петербурга, человек престарелый и болезненный. Почил о Господе в 1877 году. Похоронен в Иреме.
1877-1914. Протоиерей Феофил Кардасевич
Закончил Санкт-Петербургскую Духовную Академию со степенью кандидата в 1869 году. 8 лет прослужил в сане диакона при придворной церкви в Штутгарте. Много потрудился для Иремского храма, в 1879 году провел восстановительные работы, о чем говорит надпись на кресте в крипте. В 1883 году, обеспечил размещение в храме подарка императора Александра III к 100-летию со дня рождения великой княгини Александры – нового иконостаса. Опубликовал в духовно-просветительских журналах несколько статей посвященных истории храма и жизни великой княгини Александры Павловны. Окормлял русские общины в Мерано и Сан-Ремо. За время его настоятельства храм посетили болгарский князь Фердинанд Первый, эрцгерцог Владислав, внук эрцгерцога Иосифа Габсбурга. Служил в Иреме вплоть до начала Первой Мировой войны. Имел многочисленные награды, среди которых немецкие, сербские, болгарские и черногорские ордена. Когда умер и где похоронен неизвестно.
1914-1926. Протоиерей Стефан Колумбов
Родился в 1842 году, сын диакона Иакова Колумбова, который служил в Иреме с 1830 по 1863 годы. Входил в круг венгерских филологов, среди которых были известные ученые — Сини Йожеф, Мункачи Бернад, Ашбот Оскар. Жил в Будапеште. Умер в 1926 году, погребен в Иреме. С ним завершается история Иремского храма как придворной церкви Российской империи.
